生物安全柜操作

潔凈實(shí)驗室生物安全柜操作及使用方法

生物安全柜合理定期維護注意事項

合理定期的維護對維護任何設備的正常工作都是至關(guān)重要地，這一點(diǎn)對生物安全柜也不例外。按照下面推薦的維護日程表對安全柜進(jìn)行維護，保持其性能。為您介紹潔凈實(shí)驗室生物安全柜操作及使用方法。

一．每日維護

1）用70%的酒精（其他殺菌劑視用戶(hù)使用的材料而定）*對安全柜內部工作區域表面、側壁、后壁、窗戶(hù)進(jìn)行表面凈化。不要用含有氯的殺菌劑，因為它可能對安全柜的不銹鋼結構造成損壞。也要對紫外燈和電源輸出口表面進(jìn)行清潔。當清潔安全柜內部區域時(shí)，操作人員除了手放以外，身體的其他任何部位不能進(jìn)入安全柜。

2）檢查警報并檢測基本氣流

二．每周維護

1）用70%的酒精（其他殺菌劑視使用的材料而定）*對排水槽進(jìn)行清洗

2）檢查殘留物質(zhì)

三．每月維護

1）用濕布對安全柜外部表面進(jìn)行擦拭，尤其是安全柜的前面和上部，把堆積的灰塵打掃干凈。

2）檢查所有的維護配件的合理使用情況。

3）上述每日工作中的條目

四．每季維護

1）檢查安全柜的任何物理異?；蚬收?。檢查熒光顯像管確保它們工作正常

2）當不銹鋼上表面有難以去除的斑點(diǎn)時(shí)，可以使用MEK（methyl-ethyl-ketone）。使用WEK后，快速用清水和液體清潔劑沖洗不銹鋼板，并且用聚亞安酯布或者海綿進(jìn)行擦拭。定期清潔不銹鋼表面會(huì )使之保持表面的光滑美觀(guān)。

五．每年維護

1）具備資格的認證技術(shù)人員對安全柜進(jìn)行性能認證。

2）更換紫外燈

3）上述的每季維護

生物安全等級

生物安全等級P1

進(jìn)行試驗研究用的物質(zhì)都是已知的,所有特性都已清楚并且已證明不會(huì )導致疾病的多種微生物物質(zhì)。研究通過(guò)日常的程序在公開(kāi)的實(shí)驗臺面上進(jìn)行。不需要有特殊需求的安全保護措施。操作人員只需經(jīng)過(guò)基本的實(shí)驗室實(shí)驗程序培訓并且通常由科研人員指導，在這樣的環(huán)境下并不需要生物安全柜的存在。

生物安全等級P2

進(jìn)行試驗研究用的物質(zhì)是一些已知的中等程度危險性的并且與人類(lèi)某些常見(jiàn)疾病相關(guān)的物質(zhì)。操作者必須經(jīng)過(guò)進(jìn)行相關(guān)研究的操作培訓并且由專(zhuān)業(yè)科研人員指導。對于易于污染的物質(zhì)或者可能產(chǎn)生污染的情況進(jìn)行預先的處理準備。一些可能涉及或者產(chǎn)生有害生物物質(zhì)的操作過(guò)程都應該在生物安全柜內進(jìn)行，在這些條件下使用二級的生物安全柜。

生物安全等級P3

進(jìn)行試驗研究的物質(zhì)一般都是本土或者外來(lái)的有通過(guò)呼吸傳染使人們致病或者有生命危險的可能的物質(zhì)。我們需要保護一切在周?chē)h(huán)境中等操作者免于暴露于這些有潛在危險的物質(zhì)中。通常使用二級或者三級的生物安全柜是必需的。

生物安全等級P4

進(jìn)行試驗研究的物質(zhì)是一些非常高危險性并且可以致命的有毒物質(zhì)，可以通過(guò)空氣傳播并且現今并沒(méi)有有效的疫苗或者治療方法來(lái)處理。操作者必須經(jīng)過(guò)熟練的關(guān)于進(jìn)行這種非常高危險性物質(zhì)研究的培訓，并且應該很熟悉一些相關(guān)操作，保護設施，實(shí)驗室設計等等方面對于這些高危險性物質(zhì)的預防。同時(shí)也必須由在此研究領(lǐng)域非常有經(jīng)驗的科研人員進(jìn)行指導。對于實(shí)驗室的進(jìn)出應當嚴格的進(jìn)行控制，實(shí)驗室一定要單獨的建造或者建造在一棟大樓中于其他任何地方都分離開(kāi)的獨立房間內，并且要求有詳細的關(guān)于研究的操作手冊進(jìn)行參考。在這樣的實(shí)驗研究中三級的生物安全柜是必需的。

生物安全柜柜內操作主要注意事項：

1、緩慢移動(dòng)原則：為了避免影響正常的風(fēng)路狀態(tài)，柜內操作時(shí)手應該盡量平緩移動(dòng)。

2、物品平行擺放原則：為了避免物品和物品之間的交叉污染現象產(chǎn)生，在柜內擺放的物品應該盡量呈橫向一字擺開(kāi)，避免回風(fēng)過(guò)程中造成交叉污染。同時(shí)避免堵塞背部回風(fēng)隔柵影響正常風(fēng)路。

3、避免震動(dòng)原則：柜內盡量避免震動(dòng)儀器（例如離心機、旋渦振蕩器等）的使用，因為震動(dòng)會(huì )使得積留在濾膜上的顆粒物質(zhì)抖落，導致操作室內部潔凈度降低，同時(shí)如果在前操作面平衡失敗還會(huì )引起安全柜對操作者的污染。

4、不同樣品柜內移動(dòng)原則：柜內兩種及以上物品需要移動(dòng)時(shí)，一定遵循低污染性物品向高污染性物品移動(dòng)原則，避免污染性高的物品在移動(dòng)過(guò)程中產(chǎn)生對柜體內部的大面積污染。

5、明火使用原則：柜內盡量不要使用明火！因為在明火使用過(guò)程中產(chǎn)生的細小顆粒雜質(zhì)將被帶入濾膜區域，這些高溫雜質(zhì)會(huì )損傷濾膜。無(wú)法避免一定需要使用的時(shí)候，宜使用低火苗的本生燈。

生物安全柜操作及使用方法

1.生物安全柜的選擇

主要根據下列所需保護的類(lèi)型來(lái)選擇適當的生物安全柜：實(shí)驗對象保護；操作危險度1～4級微生物時(shí)的個(gè)體防護；暴露于放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)品時(shí)的個(gè)體防護；或上述各種防護的不同組合。表1列出了每一種防護類(lèi)型所推薦使用的生物安全柜。

操作揮發(fā)性或有毒化學(xué)品時(shí)，不應該使用將空氣重新循環(huán)排入房間的生物安全柜，即不與建筑物排風(fēng)系統相連接的Ⅰ級生物安全柜，或Ⅱ級A1型及Ⅱ級A2型生物安全柜。Ⅱ級B1型安全柜可用于操作少量揮發(fā)性化學(xué)品和放射性核素。Ⅱ級B2型安全柜也稱(chēng)為全排放型安全柜，在需要操作大量放射性核素和揮發(fā)性化學(xué)品時(shí)，必須使用這一類(lèi)型的安全柜。

2.實(shí)驗室中生物安全柜的使用位置

空氣通過(guò)前面開(kāi)口進(jìn)入生物安全柜的速度大約為0．45 m/s。這樣速度的定向氣流是極易受到干擾的，包括人員走近生物安全柜所形成的氣流、打開(kāi)窗戶(hù)、送風(fēng)系統調整以及開(kāi)關(guān)門(mén)等都可能造成影響。因此，zui為理想的是，生物安全柜應位于遠離人員活動(dòng)、物品流動(dòng)以及可能會(huì )擾亂氣流的地方。在安全柜的后方以及每一個(gè)側面要盡可能留有30 cm的空間，以利于對安全柜的維護。在安全柜的上面應留有30～35 cm的空間，以便準確測量空氣通過(guò)排風(fēng)過(guò)濾器的速度，并便于排風(fēng)過(guò)濾器的更換。

3.操作者

生物安全柜如果使用不當，其防護作用就可能大大受到影響。操作者在移動(dòng)雙臂進(jìn)出安全柜時(shí)，需要小心維持前面開(kāi)口處氣流的完整性，雙臂應該垂直地緩慢進(jìn)出前面的開(kāi)口。手和雙臂伸入到生物安全柜中等待大約一分鐘，以使安全柜調整完畢并且讓里面的空氣“掃過(guò)”手和雙臂的表面以后，才可以開(kāi)始對物品進(jìn)行處理。要在開(kāi)始實(shí)驗之前將所有必需的物品置于安全柜內，以盡可能減少雙臂進(jìn)出前面開(kāi)口的次數。

3.物品放置

Ⅱ級生物安全柜前面的進(jìn)氣格柵不能被紙、儀器設備或其他物品阻擋。放入安全柜內的物品應采用70%酒精來(lái)清除表面污染?？梢栽谙緞┙竦拿砩线M(jìn)行實(shí)驗，以吸收可能濺出的液滴。所有物品應盡可能地放在工作臺后部靠近工作臺后緣的位置，并使其在操作中不會(huì )阻擋后部格柵?？僧a(chǎn)生氣溶膠的設備（例如混勻器、離心機等）應靠近安全柜的后部放置。像有生物危害性的廢棄物袋、盛放廢棄吸管的盤(pán)子以及吸濾瓶等體積較大的物品，應該放在安全柜內的某一側。在工作臺面上的實(shí)驗操作應該按照從清潔區到污染區的方向進(jìn)行。

耐高壓滅菌的生物危害性廢棄物袋以及吸管盛放盤(pán)不應放在安全柜的外面，否則在使用這些物品時(shí)雙臂就必須頻繁進(jìn)出安全柜，這樣會(huì )干擾安全柜空氣屏障的完整性，從而影響對人員和物品的防護。

安全柜內的空氣可以通過(guò)HEPA過(guò)濾器按下列方式排出：（a）排到實(shí)驗室中，然后再通過(guò)實(shí)驗室排風(fēng)系統排到建筑物外面；（b）通過(guò)建筑物的排風(fēng)系統排到建筑物外面；（c）直接排到建筑物外面。HEPA過(guò)濾器可以裝在生物安全柜的壓力排風(fēng)系統（the exhaust plenum）里，也可以裝在建筑物的排風(fēng)系統里。有些Ⅰ級生物安全柜裝有一體式排風(fēng)扇，而其他的則是借助建筑物排風(fēng)系統的排風(fēng)扇。

Ⅰ級生物安全柜是zui早得到認可的，并且由于其設計簡(jiǎn)單，目前仍在世界各地廣泛使用。Ⅰ級生物安全柜能夠為人員和環(huán)境提供保護，也可用于操作放射性核素和揮發(fā)性有毒化學(xué)品。但因未滅菌的房間空氣通過(guò)生物安全柜正面的開(kāi)口處直接吹到工作臺面上，因此Ⅰ級生物安全柜對操作對象不能提供切實(shí)可靠的保護。

Ⅱ級生物安全柜在應用細胞和組織培養物來(lái)進(jìn)行病毒繁殖或其他培養時(shí)，未經(jīng)滅菌的房間空氣通過(guò)工作臺面是不符合要求的。Ⅱ級生物安全柜在設計上不但能提供個(gè)體防護，而且能保護工作臺面的物品不受房間空氣的污染。Ⅱ級生物安全柜有四種不同的類(lèi)型（分別為A1、A2、B1和B2型），它們不同于Ⅰ級生物安全柜之處為，只讓經(jīng)HEPA過(guò)濾的（無(wú)菌的）空氣流過(guò)工作臺面。Ⅱ級生物安全柜可用于操作危險度2級和3級的感染性物質(zhì)。在使用正壓防護服的條件下，Ⅱ級生物安全柜也可用于操作危險度4級的感染性物質(zhì)。