濕熱滅菌法

濕熱滅菌法指將物品置于滅菌柜內利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋 白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強，為熱力滅菌中zui有效、應用zui廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養基、無(wú)菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品，均可用本法滅菌。流通蒸汽不能*殺滅細菌孢子，一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。

常用的滅菌方法有濕熱滅菌法、干熱滅菌法、氣體滅菌法、輻射滅菌法和過(guò)濾除菌法。可根據被滅菌物品的特性采用一種或多種方法組合滅菌。只要產(chǎn)品允許，應盡可能選用zui終滅菌法（即產(chǎn)品分裝至包裝容器后再滅菌）滅菌。若產(chǎn)品不適合采用zui終滅菌法，可選用過(guò)濾除菌法或無(wú)菌生產(chǎn)工藝達到無(wú)菌保證要求，只要可能，應對非zui終滅菌的產(chǎn)品作補充性滅菌處理（如流通蒸汽滅菌）。 
（一）濕熱滅菌法 
指將物品置于滅菌柜內利用高壓飽和蒸汽、過(guò)熱水噴淋等手段使微生物菌體中的蛋 白質(zhì)、核酸發(fā)生變性而殺滅微生物的方法。該法滅菌能力強，為熱力滅菌中zui有效、應用zui廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養基、無(wú)菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發(fā)生變化或損壞的物品，均可用本法滅菌。流通蒸汽不能*殺滅細菌孢子，一般可作為不耐熱無(wú)菌產(chǎn)品的輔助滅菌手段。

    濕熱滅菌條件通常采用121℃*15min、121℃*15min或116℃*40min的程序，也可采用其他溫度和時(shí)間參數?？傊?，必須保證對熱穩定的物品，可采用過(guò)度殺滅法，其SAL應<=10(-12)。熱穩定性較差產(chǎn)品的標準滅菌時(shí)間F。［指當滅菌溫度為121℃，生物指示菌的耐熱參數D值為1min，滅菌溫度系數Z值為10.0℃時(shí)的標準滅菌時(shí)間（121℃下計算的微生物等效滅活率）］一般不低于8min，如產(chǎn)品的熱穩定性很差時(shí)，可允許濕熱滅菌的F。低于8min，此情況下，應在生產(chǎn)全過(guò)程中，對產(chǎn)品中污染的微生物嚴加監控，并采取各種措施降低微生物污染水平，確保被滅菌產(chǎn)品達到無(wú)菌保證要求。 
    采用濕熱滅菌時(shí)，被滅菌物品應有適當的包裝和裝載方式，不能排列過(guò)密，以保證滅菌的有效性和均一性。 
    濕熱滅菌工藝驗證時(shí)，應進(jìn)行熱分布試驗、熱穿透試驗和生物指示劑驗證試驗。以確定滅菌柜空載及不同裝載時(shí)腔室中的熱分布狀況及可能存在的冷點(diǎn)；在空載條件下，確認121℃時(shí)腔室各點(diǎn)的溫度差值應<1℃；使用插入實(shí)際物品或模擬物品內的溫度探頭，確認滅菌柜在不同裝載時(shí)，zui冷點(diǎn)物品的標準滅菌時(shí)間（F。）達到設定的標準；用生物指示劑進(jìn)一步確認在不同裝載時(shí)冷點(diǎn)處的滅菌物品達到無(wú)菌保證水平。本法常用的生物指示劑為嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子。 
影響濕熱滅菌的主要因素有：微生物的種類(lèi)與數量、蒸汽的性質(zhì)、藥品性質(zhì)和滅菌時(shí)間等。
（1）流通蒸氣滅菌法：是指在常壓條件下，采用100攝氏度流通蒸氣加熱殺滅微生物的方法，滅菌時(shí)間通常為30-60分鐘。該法適用于消毒以及不耐高熱制劑的滅菌，但不能保證殺滅所有芽孢，是非可靠的滅菌方法。
（2）間歇蒸汽滅菌法：利用反復多次的流通蒸汽加熱，殺滅所有微生物，包括芽胞。方法同流通蒸汽滅菌法，但要重復3次以上，每次間歇是將要滅菌的物體放到37℃孵箱隔夜，目的是使芽胞發(fā)育成繁殖體。若被滅菌物不耐100℃高溫，可將溫度降至75℃～80℃，加熱延長(cháng)為30～60分鐘，并增加次數。適用于不耐高熱的含糖或牛奶的培養基。
（3）高壓蒸汽滅菌法：103.4千帕蒸汽壓溫度達121.3℃，維持15-20分鐘。
濕熱法可在較低的溫度下達到與干熱法相同的滅菌效果，因為：①濕熱中蛋白吸收水份，更易凝固變性；②水分子的穿透力比空氣大，更易均勻傳遞熱能；③蒸汽有潛熱存在，每1克水由氣態(tài)變成液態(tài)可釋放出529卡熱能，可迅速提高物體的溫度。
一般采用121℃，滅菌20-30min，如果是產(chǎn)孢子的微生物則應采用滅菌后適宜溫度下培養幾小時(shí)，再滅菌一次，以用于殺死剛剛萌發(fā)的孢子。